Organoids & Advanced CRISPR

5 belangrijke vragen over Organoids & Advanced CRISPR

Kunnen we darm stamcellen in vitro groeien?

Stamcel andere groeifactoren geven zodat hij het gevoel heeft zodat hij nog in de crypt zit, zoals Wnt, EGF, R-spondin en BMP inhiberen. En als laatst is er een 3D-matrix nodig zodat de stamcellen het gevoel hebben dat ze nog in de crypt zitten. Hierdoor groeien er mini-organen die zeer sprekend lijken op onze organen. -> ze kunnen oneindig doorgroeien en dus genetisch erg stabiel

Hoe kunnen organoïden worden toegepast in kankertherapie of andere ziektes zoals CF?


Gezonde en tumorcellen van een patiënt worden gepakt en deze groeien tot organoïden. Hierop kan dan een library van medicijnen worden op toegepast om te kijken welke de patiënt het best kan hebben. Tumorcellen hebben namelijk een ander structuur dan gezonde cellen.

Dit kan ook worden toegepast op CF cellen. Gezonde cellen vormen namelijk een soort zwelling en ongezonde niet. Door een library met medicatie te testen op de organoïden, kan dit fenotype worden vergeleken.

Waarom is de natuurlijke vorm van CRISPR/Cas9 niet geschikt voor het verhelpen van de mutatie in CF-patiënten?

Heel onefficiënt doordat NHEJ gewoon plaatsvindt in 80% van de gevallen en dan niet de juiste template kan gebruiken voor het herstellen van de mutatie. Ook vormen er off-target ds breaks, omdat de target ook nog ergens anders kan zitten in het genoom en wordt dan met heel veel schade hersteld wordt op dus veel verschillende plekken.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Wat voor advanced CRISPR technieken zou je kunnen gebruiken voor het verhelpen van de mutatie in CF?

- Base editing: hebben hele specifieke lokalisatie van cas9-complexen à ook een nadeel omdat er maar een hele kleine window overblijft.
- PAM sequentie aanpassen: hiermee zou je meer specificiteit kunnen verkrijgen. Dit doe je door puntmutaties aan te brengen in cas9.
- meer gRNAs maken: meer targets
-> met deze technieken alleen puntmutaties, maar de meeste mutaties zijn deleties
- Prime editing: kan specifiek deleties inbrengen -> lage efficiëntie door semi dsDNA break waardoor er meerdere Indels ontstaan en er zijn heel veel condities waarmee rekening moet worden gehouden in organoïden.

Hoe kunnen advanced CRISPR technieken worden gebruikt om kanker modellen te maken?

Door organoïden te vormen en hierin bijv. CBE toe te passen. Hierdoor kunnen er specifiek tumor suppressor knock outs en oncogen activatie worden uitgevoerd en dus veel voorkomende mutaties in tumoren maken en nabootsen in organoïden.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo