Detectie, analyse, kwantificering van de qPCR - qPCR-productiedetectie
3 belangrijke vragen over Detectie, analyse, kwantificering van de qPCR - qPCR-productiedetectie
Hoe wordt de drempel waarde bepaald? (threshold)
Deze wordt bepaald in de eerste paar cycli. Hierin is er nog weinig product maar wel al achtergrondfluorescentie. Deze wordt bepaald en aan de hand daarvan wordt de drempel waarde bepaald
Hoe kan het dat de PCR-efficientie hoger is als 100%?
Dit kan komen wanneer er ook andere producten worden gevormd buiten het PCR-product. Deze zorgen dan voor een hoger fluorescentie signaal en dus uiteindelijk ook voor een hoger efficiëntie
Hoe bereken je met de qPCR de efficiëntie van een PCR reactie?
- Als eerst wordt er een tienvoudige verdunning reeks van een target gemaakt.
- Vervolgens wordt de qPCR uitgevoerd en worden de Ct waardes bepaald van elke verdunning
- Deze worden uitgezet in logaritmische schaal en hier komt een richtingscoëficient uit
- Vervolgens kan je met de volgende formule de % efficiëntie berekenen: eerst de E = 10 ˆ(-1/R2) en daarna % door (E-1) * 100%
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
