Basisregels voor primer-design werking van primers in de PCR - Eisen aan het ontwerp van primers voor de PCR

4 belangrijke vragen over Basisregels voor primer-design werking van primers in de PCR - Eisen aan het ontwerp van primers voor de PCR

Wat is een nadeel van langere primers (>25bp)

  • Zij verminderen de annealingsefficientie doordat zij minder gemakkelijk hybridiseren aan het target DNA,
  • Kunnen ook de specificiteit verlagen als de Tm niet juist wordt afgesteld.
  • Grotere kans op fouten in de primer, wat zorgt voor aspecifieke PCR producten

Wat is het verschil tussen intramoleculaire basenparing en intermoleculaire basenparing?

Intramoleculaire basenparing is wanneer er langere stukken met complementaire nucleotide in de primer aanwezig zijn waardoor er een haarspeld gevormd kan worden en intermoleculaire basesnparing als tussen twee primers meerdere nucleotide complementair zijn aan elkaar waardoor er een primer-dimeer wordt gevormd.

Wat houd een sterk negatieve Gibbs-energie in?

De Gibbs energie geeft de interactie aan tussen twee primers. Een sterk negatieve delta G (lager dan -10 kcal/mol) bij 25 graden geeft aan dat er makkelijk interactie tussen de primers kan ontstaan.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Wat zijn de twee belangrijkste regels met betrekking tot de Tm bij ontwerpen van primers?

  1. De Tm van de primers moet ergens tussen de 50 en de 70 graden celcius uitkomen.
  2. Het verschil tussen de Tm van de forward en de reverse primer mag niet groter zijn dan 2 a 3 graden.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo