Biotechonology - Cloning genomes in pieces and foreign genes in host cells

9 belangrijke vragen over Biotechonology - Cloning genomes in pieces and foreign genes in host cells

Wat is de genomic library en wat is hier het doel van?

Een verzameling klonen die fragmenten bevat die het volledige genoom van een organisme vertegenwoordigen.

Het doel van de constructie van een genomische bibliotheek is om al het DNA dat is afgeleid van een enkel organisme of geïsoleerd uit een enkele omgeving, in een set kloneringsvectoren te brengen.  Door op deze manier DNA rechtstreeks uit de omgeving te klonen, ontstaat een metagenomisch gebied.

Wat is de genetic complementation?

Het vermogen van een gen om, wanneer het in een cel wordt geïntroduceerd zonder een functionele kopie van dat gen, het wild-type fenotype in de cel te herstellen.  Zie ook fenotypische redding.

De genetic complementation van een deficiëntie in de gastheercel wordt soms fenotypische redding genoemd, omdat het mutante fenotype (ten minste gedeeltelijk) wordt hersteld of "" wordt gered ".

Hoe worden gastheercellen die het geninteresse dragen geïdentificeerd? (bij microben)

Fenotypische reddings óf PCR-amplificatie van het gen van belang nadat de vector is geïsoleerd uit kandidaat-transformanten.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Wat zijn expression vectors?

Een plasmide waarin een recombinant gen is gekloond;  wanneer het zich in gastheercellen bevindt, wordt het gen getranscribeerd en het eiwit wordt gesynthetiseerd.

Hoe heet de veelgebruikte methode waarmee eiwitten worden gezuiverd?

Polyhistidine tagging, oftwel His-tagging.

Wat is polyhistidine tagging/ His-tagging?

Een methode waarbij een eiwit wordt gefuseerd met zes  histidineresiduen (6xHis-tag), waardoor de zuivering van het eiwit door middel van affiniteitschromatografie wordt vergemakkelijkt. Dit kan zowel aan de N of C-terminus worden toegevoegd.

Waarom wordt specifiek Histidine gebruikt voor het zuiveren van eiwitten?

Histidine wordt gebruikt omdat het een hoge affiniteit heeft voor metaalionen, dus een eiwit dat meerdere opeenvolgende histidineresiduen draagt, zal bij voorkeur binden aan een vastefasemateriaal, dat blootgestelde nikkel- of kobaltatomen heeft.

Wat is GFP (green fluorescent protein)?

Een eiwit van de kwal Aequorea victoria dat fluoresceert bij belichting op een specifieke golflengte.  Het gen voor GFP kan worden gefuseerd met genpromotors om te bepalen wanneer een gen tot expressie wordt gebracht (transcriptionele fusie).  Wanneer gefuseerd met de coderende sequentie van een gen zodat een chimeer eiwit wordt geproduceerd, onthult GFP-fluorescentie de lokalisatie van het eiwit (translationele fusie).

Wat is een chimeer eiwit?

Een eiwit dat uit twee delen bestaat: het eiwit dat wordt bestudeerd en GFP.  Telkens wanneer dat eiwit wordt gemaakt, en waar het ook in de cel gaat, zal het eiwit fluoresceren.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo