Bevestiging positieve PCR-reactie - grootte van PCR product

8 belangrijke vragen over Bevestiging positieve PCR-reactie - grootte van PCR product

Hoe bepaal je de grootte van een PCR product?

  • Primers flankeren het gebied.
  • DNA aankleuren (EtBr)
  • elektroforese inzetten (agarose gel).
  • ladder meegenomen.
  • a.d.v. Ladden grootte fragmenten bepalen.

Welke eigenschappen heeft EtBr (intercalerende stof)?

  • Zout en goed oplosbaar in water.
  • bevat 4 ringstructuren.
  • voorkeur voor apolair (hydrofoob) milieu.

Waar moet je rekening mee houden bij EtBr en UV licht?

  • EtBr heeft 4 aromatische ringen (groter dan DNA).
  • dsDNA onder druk en onrolt.
  • kans op breken EtBr i.c.m. UV.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Waarom gebruiken we liever Gelred dan EtBr?

Is minder toxisch.

Waarvan is de migratie van DNA fragmenten in een gel afhankelijk?

  • het percentage van de agarosegel.
  • het voltage tijdens de elektroforese.
  • de buffer.
  • de conformatie van het DNA.
  • de aanwezigheid van o.a. kleurstoffen.

Waarom voegen we een loading dye toe aan de DNA samples?

  • De loadingbuffer bevat glycerol of sucrose bijvoorbeeld, dit verzwaart de samples. Hierdoor blijft het DNA sample goed in het slotje zitten en wordt voorkomen dat het mengt met de elektroforese buffer.
  • De kleurstof die toegevoegd is (bijvoorbeeld broomfenolblauw) maakt het mogelijk om het DNA sample goed te zien tijdens het laden en te zien welke slotjes al geladen zijn.
  • Daarnaast migreert de kleurstof ook door de matrix van de gel heen en is zodoende een indicator voor hoe lang de DNA samples gerund moeten worden op de gel.

Wat is een veel voorkomende kleurstof in loading buffers?

Orange G.

Hoe werkt orange G.

  • Bindt niet aan het DNA.
  • migreert zelf mee door de agarose gel.
  • kleine - lading.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo