Boom extractie technologie

6 belangrijke vragen over Boom extractie technologie

Hoe werkt de Boom extractie methode?

  • lysis buffer toevoegen (lysis).
  • magnetische silica beads toevoegen aan cellysaat (binding nucleïnezuren).
  • wasbuffer toevoegen (purificatie).
  • toevoegen elutiebuffer. (zoutbruggen kwijtraken).

Waarom word ervoor gekozen om chaotrope zouten in de lysis buffer te stoppen?

  • maakt het water als het ware minder polair.
  • eiwitten ontvouwen (denatureren) + vetten beter opbaar.
  • cellen lyseren en eiwitten denatureren -> nucleases worden uitgeschakeld.

Hoe zorgen chaotrope zouten ervoor dat de eiwitten ontvouwen?

  • eigenschap om het sterk georganiseerde netwerk van watermoleculen te verstoren (door bijvoorbeeld waterstofbruggen te verbreken).
  • chaotrope reagentia verhogen de entropie van het systeem
  • verlagen het hydrofobe effect, ze destabiliseren hydrofobe structuren in een eiwit.
  • Onder normale omstandigheden vouwen hydrofobe regio’s van eiwit naar binnen als deze zich in water bevinden. Doordat een chaotroop reagens de entropie verhoogt, heeft water minder invloed op de hydrofobe interacties.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Waarom word er gebruik gemaakt van cation bruggen?

  • De zoutbrug wordt gevormd tussen het silica (beads/membraan) en de negatief geladen backbone van het DNA.
  • De silica is ook negatief geladen.
  • Zonder zoutbrug zouden de negatief geladen nucleïnezuren niet kunnen binden.
  • Een hoge concentratie zout (Na+) in de lysisbuffer is nodig voor de vorming van zoutbruggen om de binding van de nucleïnezuren te bevorderen.




Wat word er verwijderd bij de wasstap?

  • celresten
  • eiwitten
  • vetten
  • GuSCN
  • eventuele andere PCR remmers.

Waarom word de Boom Extractie methode als de "gouden standaard" gezien?

  • dat de lysisbuffer in de eerste stap er meteen voor zorgt dat het monster niet meer infectieus is,.
  • dat er géén ethanol wordt gebruikt tijdens de gehele isolatie procedure (resten alcohol remmen de qPCR in de Vervolgstap).
  • dat het monster nadat het uit dit kolommetje komt, direct geschikt is om te gebruiken in een PCR, omdat de boraatbuffer een hele lage molariteit heeft en de PCR buffer deze pH dus direct overrulet.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo