Theorie celkweek - Hybridomatechnologie voor productie van monoclonale antilichamen
8 belangrijke vragen over Theorie celkweek - Hybridomatechnologie voor productie van monoclonale antilichamen
Selectie van heteroploïde cellen
Ze bevatten niet het enzym HGPRT-ase
Cellen worden in 8-AG medium gebracht
Door HGPRT- nemen ze de 8-AG niet op
HGPRT + cellen gaan dood
Heteroploïde cellen blijven over
Selectie van hybridoma cellen
Hybridecellen zijn dus ook HGPRT +
Cellen worden in HAT medium gebracht
Aminopterine blokkeert de normale syntheseweg voor DNA
dmv HGPRT-ase en thymidine kinase kan de cel hypoxanthine en thymidine afbreken om te gebruiken voor de alternatieve pathway voor DNA productie
Cellen die de HAT selectie niet overleven, en waarom niet
Plasmacellen die niet zijn gefuseerd; cellen kunnen niet in vitro overleven dus gaan evengoed dood, ookal zijn ze HGPRT +
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Hybridomacellen in leven houden
feeder-layer, vaak macrofagen (groeien niet in vitro maar blijven wel lang in leven)
Selectie van de klonen van hybridomacellen (polyclonaal naar monoclonaal)
Dan selectie dmv ELISA
de klonen maken antilichamen
welletjes bevatten antigenen voor het gewenste antilichaam, gelabeld om een substraat om te kunnen zetten
antilichamen aan de hybridomacellen binden
rest worden weggewassen
je houdt monoclonale cellen over
na toevoeging vh substraat is fluorescentie zichtbaar
Produceren van de hybridomacellen na selectie
cellen zo snel mogelijk invriezen
Zuiveren van het product, na opkweking
niet alle antistoffen kunnen hiertegen: ze denatureren of zijn wel zuiver maar niet meer actief
Toepassingen monoklonale antistoffen
sneldiagnostiek, bv van meningitis
diagnostiek van moeilijk kweekbare micro-organismen zoals het cytomegalovirus
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden