Theorie celkweek - Hybridomatechnologie voor productie van monoclonale antilichamen

8 belangrijke vragen over Theorie celkweek - Hybridomatechnologie voor productie van monoclonale antilichamen

Selectie van heteroploïde cellen

Heteroploïde cellen zijn HGPRT -
Ze bevatten niet het enzym HGPRT-ase
Cellen worden in 8-AG medium gebracht
Door HGPRT- nemen ze de 8-AG niet op
HGPRT + cellen gaan dood
Heteroploïde cellen blijven over

Selectie van hybridoma cellen

Plasmacellen zijn HGPRT +
Hybridecellen zijn dus ook HGPRT +
Cellen worden in HAT medium gebracht
Aminopterine blokkeert de normale syntheseweg voor DNA
dmv HGPRT-ase en thymidine kinase kan de cel hypoxanthine en thymidine afbreken om te gebruiken voor de alternatieve pathway voor DNA productie

Cellen die de HAT selectie niet overleven, en waarom niet

Heteroploïde cellen die niet zijn gefuseerd; HGPRT is afwezig, dus de cellen gaan dood door Aminopterine
Plasmacellen die niet zijn gefuseerd; cellen kunnen niet in vitro overleven dus gaan evengoed dood, ookal zijn ze HGPRT +
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Hybridomacellen in leven houden

ze overleven moeilijk; extra groeifactor:
feeder-layer, vaak macrofagen (groeien niet in vitro maar blijven wel lang in leven)

Selectie van de klonen van hybridomacellen (polyclonaal naar monoclonaal)

na uitzaaiïng in microtiterplaatjes: 10-14 dagen tot de eerste klonen
Dan selectie dmv ELISA
de klonen maken antilichamen
welletjes bevatten antigenen voor het gewenste antilichaam, gelabeld om een substraat om te kunnen zetten
antilichamen aan de hybridomacellen binden
rest worden weggewassen
je houdt monoclonale cellen over
na toevoeging vh substraat is fluorescentie zichtbaar

Produceren van de hybridomacellen na selectie

snel subcloneren, hybridomacellen zijn genetische erg instabiel en kunnen snel overgroeid raken door 'gewone' cellen
cellen zo snel mogelijk invriezen

Zuiveren van het product, na opkweking

is de meeste moeilijke en kostbare fase
niet alle antistoffen kunnen hiertegen: ze denatureren of zijn wel zuiver maar niet meer actief

Toepassingen monoklonale antistoffen

diagnostiek van tumoren en therapeutisch gebruik hiervan
sneldiagnostiek, bv van meningitis
diagnostiek van moeilijk kweekbare micro-organismen zoals het cytomegalovirus

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo