Startpagina / Samenvattingen / chromatografie / deeltjes-gpc-basis

Gelpermeatie chromatografie (GPC)

6 belangrijke vragen over Gelpermeatie chromatografie (GPC)

Op basis van wat worden moleculen gescheiden bij GPC?

Worden gescheiden op basis van de effectieve afmetingen in oplossing. Worden bepaald door de molecuulmassa, maar ook door de vorm van de moleculen. Pieken in chromatogram komen overeen met de fracties van verschillende molecuulmassa's, van hoog naar laag
Retentietijd wordt groter naarmate de afmetingen van de moleculen kleiner zijn

Hoe ziet een kolom voor GPC er uit?

Kolom met poreuze deeltjes als stationaire fase
als mobiele fase is er een oplossing van de te bepalen deeltjes (kleinere deeltjes passen in meer holtes en dus hebben een langere weglengte)

Wat is het verschil tussen GPC en HPLC?

Scheidingsprincipe (op basis van grootte van de deeltjes) en toepassingsgebied (polymeren en biomoleculen).
GPC maakt ook meer gebruik van brekingsindexdetector.

Hoe gebeurt de kwantificatie bij GPC?

Er wordt een universele calibratiecurve gebruikt (vaak van polystyreenstandaarden) aangezien polymeren moeilijk te scheiden zijn. Dit is minder correct, maar vaak wel voldoende voor de kwantificatie.

Wat is totale exclusie en totale permeatie?

Totale exclusie betekend dat de deeltjes te groot zijn, en mee met het dood volume door de kolom gaan.
Totale permeatie betekend dat de deeltjes te klein zijn en volledig in de poriën van de kolom gaan en deze oververzadigen. Om dit te vermijden is het belangrijk om in het lineair werkgebied te blijven.

Welke toepassingen kent deze techniek nog?

De samenstelling van een polymeer onderzoeken: er is te zien of het polymeer goed gevormd is, en dat er nog een klein aantal mono-,digo-,trigo-, … meren aanwezig zijn.
De verdeling van de molaire massa’s te onderzoeken
Scheiding van proteïne.