Startpagina / Samenvattingen / E-module Microscopie / labelen-dna-antilichaam

Chemische trucs

6 belangrijke vragen over Chemische trucs

Wat is het verschil tussen direct en indirect labelen?

Bij direct labelen bindt een primair antilichaam aan het antigen om deze te labelen. Bij indirect labelen bindt een primair antilichaam aan het antigen en bindt een secundair antilichaam aan het primaire om het gehele antilichaam-antigen complex te labelen

Wat is immunogoud labelen?

Het antilichaam is gebonden aan een goudbolletje. Dit is alleen mogelijk met een SEM of een TEM (de bolletjes zijn kleiner dan de resolutie van een bright field microscoop). Artefacten zijn wel mogelijk vanwege de afstand tussen het goudbolletje en het gelabelde object.

Hoe werkt labelen via synthetische DNA analogen?

Dit werkt dmv bijvoorbeeld immunofluorescentie. De synthetische analogen worden ingebouwd in DNA. Celproliferatie is een belangrijk aspect van deze methode. Voor de visualisatie is denaturatie van DNA nodig. Antilichamen zullen dan binden aan de synthetische DNA analogen, waardoor hun locatie wordt aangegeven.

Hoe werkt labelen via in situ hybridisatie van DNA?

De complementaire streng van de gezochte sequentie wordt ingebracht, welke dan wordt ingebouwd in het DNA. Hierna kun je de locatie achterhalen dmv de labels aan de complementaire streng (bvb fluorescent (FISH) of gold-reliant (GOLDFISH)).

Wat is GFP en wat doet het/hoe wordt het gebruikt?

Green Fluorescent Proteïn en het wordt gebruikt in levende cellen. Je hebt twee verschillende soorten: fusion tag of reporter gen. GFP werkt als fusion tag wanneer het fuseert met de gensequentie van het doelproteïne. Het werkt als reporter gen wanneer het linkt met het doelgen en een signaal geeft bij genexpressie. Ook kan GFP een verandering in het milieu aangeven.

Wat is het verschil tussen een immunofluorescentie en een fluorescente kleuring?

Immunofluorescentie is gebonden aan een antilichaam en kleurt dus specifieke (bvb) proteïnes. Een fluorescente kleuring kleurt gehele structuren in levende cellen.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

E-module Microscopie

Bekijk samenvatting