Chromatography and proteomics - Chromatografie
10 belangrijke vragen over Chromatography and proteomics - Chromatografie
Wat zijn de verschillende systemen voor scheidingsmethoden?
- Vloeistofchromatografie (LC)
- Gaschromatografie (GC)
Voor de scheiding van eiwitten wordt meestal gebruikt gemaakt van vloeistofchromatografie.
Wat zijn de verschillende kolommen gebruikt in de vloeistof- versus gaschromatografie?
- Vloeistofchromatografie (LC): mobiele fase is een vloeistof, bijv. HPLC. Kolom HPLC: 15cm x 4.6mm x 5micrometer.
- Gaschromatografie (GC): mobiele fase is gas. Kolom GC: 30m x 0.25mm.
Wat is het verschil tussen LC en GC?
- Mobiele fase: vloeistof
- Stationaire fase: oppervlak (kolom)
- Analiet interacteert met beide fasen
GC
- Mobiele fase: gas (draagt het analiet door de kolom)
- Stationaire fase (oppervlak): interacteert met analiet
- Hogere temperaturen, want gasfase: daardoor minder geschikt voor eiwitten, maar wel voor eiwitproducten of substraten/metabolieten. Voor kleinere en vluchtigere moleculen dan LC.
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Voor mijn 1e tentamen haalde ik een 6. Toen ben ik gaan zoeken naar manieren om beter te leren en ben ik Study Smart tegen gekomen. Sindsdien heb ik een 9,0 - 8,0 - 7,6 - 8,0 - 8,0 gehaald. Ik raad het echt íédereen aan die het maar horen wil. Ik ben er zo blij mee!!
Met mijn oude methode was ik geslaagd voor maar 3 van de 8 vakken. Sinds ik mijn aantekeningen digitaal maak in study smart, ben ik voor alle vakken de éérste keer geslaagd. StudySmart neemt voor mij de stress van slagen of niet slagen weg.
Door StudySmart gaat het op zo veel vlakken beter met mij. Eerst had ik continu studiestress en ik had nergens tijd voor. Nu voel ik mij rustig en zelfverzekerd (door gebruik van het programma). Eerst haalde ik meestal een 7, nu vaak een 8 of zelfs een 9.
Hey Chris, ik wil je echt hartelijk danken voor het ontwikkelen van het platform. Ik haalde hiervoor altijd rond de 6/10 voor m'n tentamens, nu een 8,6, een 7,9 en een 7,6!!
Sinds ik Study Smart gebruik, is mijn gemiddelde 1 punt gestegen. Ik heb zelfs een statistisch vak met een 10/10 afgerond terwijl ik slecht ben in statistiek. Nu volg ik extra vakken omdat vorig jaar zo goed ging door Study Smart. Veel dank!
Sinds ik ben gaan leren met StudySmart ben ik geslaagd voor al mijn examens!!! Geen herexamens!! Eerst was ik al blij met een voldoende en nu haal ik alleen maar goede cijfers. Veel dank!
Ik heb alle vakken die ik met Study Smart heb geleerd gehaald. Met rechten ben ik van een 5 naar een 8 gegaan! Ik weet nu zeker dat ik al mijn vakken gewoon ga halen.
Ik dacht altijd dat ik goed studeerde. Mijn cijfers waren ook prima. Ik had mij nooit kunnen voorstellen dat ik zo veel beter en sneller zou studeren door het toepassen van deze vaardigheden.
Ik voel mij voor het eerst 100% zeker over de manier waarop ik leer. Ik heb nu het complete overzicht en de structuur die ik nodig had
Door Study Smart kreeg ik weer plezier in het studeren en haalde ik direct betere cijfers. Alles ging ineens beter. Ik raad Study Smart enorm aan aan scholieren en studenten.
Met dit plaform kan ik super snel en gestructueerd studeren. Ik ben nooit meer de weg kwijt in de stof of in mijn aantekeningen en maak veel sneller goede samenvattingen.
Eerst waren mijn aantekeningen een zooitje. Nu gebruik ik Study Smart en studeer ik super gestructureerd. Het helpt mij om tijd te besparen waardoor ik ook andere dingen kan doen die ik belangrijk vind.
Leerlingen die met het systeem hebben gewerkt hebben gewoon een beter resultaat behaald. Het systeem past alle leertrucjes zo toe, dat zowel de kinderen die goed scoren, maar ook zij die minder scoren, aan hun trekken komen.
Hey Chris, ik wil je enorm bedanken. Het vak waar ik vorig jaar nog net een 5,5 voor haalde, heb ik nu voor ditzelfde vak maar liefst een 9,7 gehaald! Mede dankzij jouw methode! Heel erg bedankt!
Het grootste effect is dat mijn kind veel enthousiaster is over school! Elke ouder wilt graag dat zijn kind het goed doet op school, en Study Smart draagt daar aan bij.
Dankzij StudySmart heb ik vorig jaar al mn examens gehaald en ook veel betere punten gehaald. Maar bovenal heb ik nu gewoon een heel goede studiemethode onder de knie, waarmee ik zeker weet dat ik de rest van mijn studie gewoon ga halen.
Wat zijn de componenten van een HPLC (en FPLC)?
Wat is het verschil tussen HPLC en FPLC?
- HPLC wordt vaak gebruikt in chemische laboratoria
- FPLC wordt vaker gebruikt voor biomoleculen (minder extreem, want de druk en de flow rate worden beperkt gehouden)
Wat zijn (de overeenkomsten tussen) RPC en HIC?
- De manier van scheiding is gelijk. Scheiding is afhankelijk/gebaseerd op verschillen in hydrofobiciteit.
- Stationaire fase is hydrofoob, scheiding is gebaseerd op de hydrofobe moleculen die aan de kolom binden.
- RPC wordt vooral gebruikt voor het scheiden van peptiden, eiwitten binden te sterk met de kolom wat scheiding bemoeilijkt.
- Voor elutie moeten de hydrofobe interacties worden verbroken.
- Mobiele fase: waterige oplossing
- Elutie: sterker organisch apolair oplosmiddel
Wat is het stapsgewijs proces van RPC?
- Eiwitten (peptiden) worden gebonden aan de hydrofobe kolom (eiwitten zonder hydrofoob deel komen direct mee met het waterige oplosmiddel).
- Organisch oplosmiddel wordt verhoogd -> eiwit met minst krachtige hydrofobiciteit zal als eerste loslaten van de kolom.
- Wasstap met nog sterker organisch middel, voor wassen van de laatste deeltjes van de kolom.
Wat is Ion-Exchange Chromatography (IEC)?
- Negatief geladen kolom (kationenwisselaar) bindt positieve ionen (kationen)
- Vice versa voor anionen
- pH belangrijk voor nettolading eiwitten (note pI waarde) -> spelen met pH waarde door gebruik te maken van de pI.
- Elutie: toename van zoutconcentratie, pH verandering
Wat is gelpermeability chromatography (gelfiltration, size exclusion)?
- Grote deeltjes migreren snel
- Kleine deeltjes migreren langzaam
- Ook; spin columns voor ontzouten
Wat zijn de verschillende detectiemethoden voor LC?
- UV/Vis detector
-> meet absorptie van licht (vaste of gevarieerde golflengte) -> eiwitten 280 nm absorptie m.n. tyrosine/tryptofaan - Fluorescence detector -> excitatie en meet emissie van licht
- Electrochemical detector -> meet veranderingen in stroom/spanning (Volt) (amperometrisch)
-> coulometrisch (chemische reactie)
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden
