Startpagina / Samenvattingen / Class notes - Eiwittechnologie / ms-moleculen-lading

Mass spectrometry - Massaspectrometrie

Q: Wat zijn de fysische eigenschappen die relevant zijn in een MS systeem?

Massa (m) : grote deeltjes => lagere snelheid Lading (z) : hogere lading => hogere snelheid Tijd: afhankelijk van de massa Vacuüm: voor voorkomen van ongewenste botsingen met andere moleculen

Q: Waaruit bestaat de matrix bij MALDI? En wat is de functie hiervan?

De matrix bij MALDI bestaat uit bijvoorbeeld sinapinic acid , door deze aromatische structuur met veel dubbele bindingen kan de straling makkelijker worden opgenomen en protonen afstaan aan het eiwit (monster). Laag molecuulgewicht Vaak zure verbinding (zwak organisch zuur) Sterke UV/IR absorptie

Q: Wat is het principe van de ionisatie-methode ESI?

Electrospray Ionization . Druppels geladen moleculen worden geproduceerd (vloeistof) Vloeistof wordt verdampt Productie van geladen gas druppels ( ionisatie in gecondenseerde fase ) Een vloeistofmonster wordt uit een (verwarmde) naald gespoten met een hoog voltage erop, hierdoor ontstaat een fijne aërosolmist van geladen druppeltjes. De geladen druppeltjes ondergaan verwoesting en splijting dmv verwarmd drooggas . Het gasfase-analiet (MH+) heeft een hogere lading dan het initiële druppeltje. -> MS scheiding m/z.

Q: Wat is het principe van de ionisatie-methode APCI?

Atmospheric Pressure Chemical Ionization . Vernevelend gas wordt verwarmd -> vormt aerosolen Verwarmd gebied met hoog potentieel -> ionisatie ( in gas fase ) Meer geschikt voor moleculen die makkelijk te verdampen zijn (lager kookpunt), dus minder geschikt voor eiwitten. Een gasnevel wordt door een verhitte naald geleid -> ruimte met een Corona elektrode pin , die sterk verhit is en onder hoge spanning staat, dit geeft de aerosolen een lading en deze zullen de MS ingaan.

Q: Wat is het principe van de ionisatiemethode APPI?

Atmospheric Pressure Photo Ionization . Vernevelend gas wordt verwarmd -> vormt aerosolen Met lamp met fotonen (energie groter is dan het ionisatiepotentiaal -> ionisatie. een gasnevel wordt door een verhitte naald geleid en vormt aerosolen -> ruimte met een lamp (UV) met fotonen , de fotonen worden geabsorbeerd en de deeltjes krijgen een lading -> MS.

Q: Wat zijn de belangrijkste mass analyzers die bij massaspectrometrie (MS) worden gebruikt?

Quadrupole (gecombineerd met bijv HPLC-ESI) Ion trap Time-of-Flight (TOF) (vaak gecombineerd met MALDI, snel)

12 belangrijke vragen over Mass spectrometry - Massaspectrometrie

Wat is het stapsgewijs principe van massaspectrometrie (MS)?

LC/MS systeem:

Scheiding van monstercomponenten met HPLC
Gescheiden monstersoorten in ionisator (alle moleculen worden geïnoseerd)
Mass analyser om ionen te sorteren (massa/lading (m/z) ratio)
Detector om ionen te 'tellen'
Hoog vacuüm (er mag geen botsing met andere moleculen zijn)

-> Scheiding MS is op basis van m/z.

Wat zijn de fysische eigenschappen die relevant zijn in een MS systeem?

Massa (m): grote deeltjes => lagere snelheid
Lading (z): hogere lading => hogere snelheid
Tijd: afhankelijk van de massa
Vacuüm: voor voorkomen van ongewenste botsingen met andere moleculen

Wat zijn de 7 hoofdelementen van een LC-MS?

Ion source
Skimmer cone (kleine opening voor gas)
Quadrupole
Collision cell
Quadrupole
Detector
Vacuum systeem

Waaruit bestaat de matrix bij MALDI? En wat is de functie hiervan?

De matrix bij MALDI bestaat uit bijvoorbeeld sinapinic acid, door deze aromatische structuur met veel dubbele bindingen kan de straling makkelijker worden opgenomen en protonen afstaan aan het eiwit (monster).

Laag molecuulgewicht
Vaak zure verbinding (zwak organisch zuur)
Sterke UV/IR absorptie

Wat is het principe van de ionisatie-methode ESI?

Electrospray Ionization.

Druppels geladen moleculen worden geproduceerd (vloeistof)
Vloeistof wordt verdampt
Productie van geladen gas druppels (ionisatie in gecondenseerde fase)

Een vloeistofmonster wordt uit een (verwarmde) naald gespoten met een hoog voltage erop, hierdoor ontstaat een fijne aërosolmist van geladen druppeltjes. De geladen druppeltjes ondergaan verwoesting en splijting dmv verwarmd drooggas. Het gasfase-analiet (MH+) heeft een hogere lading dan het initiële druppeltje. -> MS scheiding m/z.

Wat is het principe van de ionisatie-methode APCI?

Atmospheric Pressure Chemical Ionization.

Vernevelend gas wordt verwarmd -> vormt aerosolen
Verwarmd gebied met hoog potentieel -> ionisatie (in gas fase)

Meer geschikt voor moleculen die makkelijk te verdampen zijn (lager kookpunt), dus minder geschikt voor eiwitten.
Een gasnevel wordt door een verhitte naald geleid -> ruimte met een Corona elektrode pin, die sterk verhit is en onder hoge spanning staat, dit geeft de aerosolen een lading en deze zullen de MS ingaan.

Wat is het principe van de ionisatiemethode APPI?

Atmospheric Pressure Photo Ionization.

Vernevelend gas wordt verwarmd -> vormt aerosolen
Met lamp met fotonen (energie groter is dan het ionisatiepotentiaal -> ionisatie.

een gasnevel wordt door een verhitte naald geleid en vormt aerosolen -> ruimte met een lamp (UV) met fotonen, de fotonen worden geabsorbeerd en de deeltjes krijgen een lading -> MS.

Wat zijn de belangrijkste mass analyzers die bij massaspectrometrie (MS) worden gebruikt?

Quadrupole (gecombineerd met bijv HPLC-ESI)
Ion trap
Time-of-Flight (TOF) (vaak gecombineerd met MALDI, snel)

Wat is het principe van de mass analyzer quadrupole?

Ionen bewegen in een elektrisch veld
4 parallele op gelijke afstand gelegen staven (polen) -> elektroden, de staven hebben een verdeelde lading, die continu veranderd
Tegenovergestelde polen hebben tegenovergestelde lading
Positief geladen ionen lopen van links naar rechts (richting minpool)
Elektrisch veld variabel: sterkte en frequentie
Scheiding ionen op basis van m/z ratio

Wat zijn de voor- en nadelen van een Ion Trap?

Voordelen:

Hoge sensitiviteit
Hoge resolutie

Nadelen:

Lage capaciteit (verzadiging)
Hogere behoeften (>100 Da mw)

Wat is het principe van de mass analyzer Time-of-Flight (TOF)?

TOF detecteert de tijd dat ionen erover doen om van de ion source naar de detector te reizen. De snelheid wordt bepaald door de m/z ratio waarbij hoe lager m/z, hoe sneller het ion.

Wat zijn de voor- en nadelen van een TOF mass analyzer?

Voordelen:

Hoge ion transmissie
Goede detectielimiet
Hoog massabereik

Nadelen:

Vaak gecombineerd met digitaliseerders met beperkt dynamisch bereik

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

Eiwittechnologie

Bekijk samenvatting

Een unieke studie- en oefentool
Nooit meer iets twee keer studeren
Haal de cijfers waar je op hoopt
100% zeker alles onthouden

Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.

Onderwerpen die gerelateerd zijn aan Mass spectrometry - Massaspectrometrie

Mass spectrometry - Massaspectrometrie - Eiwitidentificatie met MS

Studiemateriaal generieke omslagafbeelding

Mass spectrometry - Massaspectrometrie

12 belangrijke vragen over Mass spectrometry - Massaspectrometrie

Wat is het stapsgewijs principe van massaspectrometrie (MS)?

Wat zijn de fysische eigenschappen die relevant zijn in een MS systeem?

Wat zijn de 7 hoofdelementen van een LC-MS?

Waaruit bestaat de matrix bij MALDI? En wat is de functie hiervan?

Wat is het principe van de ionisatie-methode ESI?

Wat is het principe van de ionisatie-methode APCI?

Wat is het principe van de ionisatiemethode APPI?

Wat zijn de belangrijkste mass analyzers die bij massaspectrometrie (MS) worden gebruikt?

Wat is het principe van de mass analyzer quadrupole?

Wat zijn de voor- en nadelen van een Ion Trap?

Wat is het principe van de mass analyzer Time-of-Flight (TOF)?

Wat zijn de voor- en nadelen van een TOF mass analyzer?

Onderwerpen die gerelateerd zijn aan Mass spectrometry - Massaspectrometrie

Mass spectrometry - Massaspectrometrie - Eiwitidentificatie met MS

Samenvattingen die gerelateerd zijn aan Eiwit domeinen

Class notes - Eiwittechnologie

Reed: Practical Skills in Biomolecular scien…

Exploring humans an introduction to the phil…

Psychologie & sociologie : basiscursus

sheets

Leren veranderen

Overheidsfinanciën

Hoofdzaken socialezekerheidsrecht

Handboek van het Nederlandse staatsrecht

Van de BV en de NV

Socialezekerheidsrecht

Schets van het Nederlandse arbeidsrecht