Analysetechnieken en detectoren
16 belangrijke vragen over Analysetechnieken en detectoren
Tot niet zo heel lang geleden was de GC het grootste trekpaard wat betreft de toxicologische analyses. Maar de LC is steeds populairder geworden. Waarom is dat?
Wat is het grootste verschil van de LC t.o.v. GC?
- Waterige oplossingen kunnen namelijk in één keer de LC in, waardoor er minder lastige extracties nodig zijn.
- Bij GC mag dit NIET!
- Bij de analyse van urine door de LC moeten alleen de eiwitten neergeslagen worden, voordat het te injecteren is.
Benoem een aantal verschillen tussen GC en LC:
- Bij de LC is er vaak geen temperatuurprogramma
- Je kunt verschillende soorten mobiele fase met eventuele gradiënt kiezen bij LC
- Verschil in golflengte bij de UV-detector
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Waarvan is de keuze van mobiele fase afhankelijk en wanneer is dit isocratisch of met gradiënt?
Afhankelijk van het systeem en van de scheiding (reversed phase → apolaire kolom en polaire mobiele fase; of normal phase → polaire kolom en een apolaire mobiele fase):
Wanneer er één mobiele fase gedurende de gehele run wordt gebruikt, wordt dit isocratisch genoemd.
Ook kan er een mobiele fase met gradiënt worden gebruikt, waarbij de samenstelling van de mobiele fase verandert tijdens de run. Met behulp van de gradiënt kunnen pieken versnellen, waardoor de scheiding geoptimaliseerd kan worden.
Wat kun je met de pomp instellen? En wat is hiervan het nut?
Nut: Zo kun je dus spelen met je extractie/scheiding om je pieken bij elkaar te krijgen zodat je niet te lang hoeft te meten, maar wel zorgt dat de pieken genoeg uit elkaar liggen zodat je ze van elkaar kan onderscheiden
Waar is de keuze in discrete golflengtes van afhankelijk?
Wanneer mogelijk, kun je een scan over een range golflengtes laten uitvoeren (diode array detector).
- Bij een enkele golflengte kijk je ook bij een bepaalde bandbreedte
Wat moet er bij het selecteren van de vials worden aangegeven?
Waarom kan de detector alleen pieken van dezelfde stof met elkaar vergelijken?
Waarom voer je kwaliteitscontroles altijd in als unknown run? En welke extra stap doe je bij kwantitatief onderzoek?
Bij kwantitatief onderzoek moet je wel eerst de retentietijd en de (herberekende) concentraties van de standaarden invoeren.
- Hieruit zal een chromatogram volgen met al dan niet een UV-scan.
- Ook kan er een ijklijn te zien zijn.
Tegenwoordig wordt er ook vaak gebruik gemaakt van de LC-MS, maar hier doet zich een probleem voor. Ligt dit toe en wat kan dit probleem verhelpen?
Waarom heb je bij LC i.t.t. GC minder mooi chromatogram?
Benoem een voordeel van UV-scan met DAD:
Waarvoor staat ESI, wat is de werking en benoem een nadeel?
Hoge lading en temperatuur op uitgang, waardoor deeltjes positief geladen worden. Stoten elkaar hierdoor sterk af, waardoor ze uit elkaar bewegen (spray) M.b.v. stikstofgas verdampt oplosmiddel, waardoor druppels steeds kleiner worden tot uiteindelijk molecuulionen.
Een nadeel is wel dat dit zachte ionisatie is en dus weinig fragmentatie ontstaat.
- Daarom alleen gebruik gemaakt van LC-MS/MS
Wat is een verschil van LC-MS/MS t.o.v. GC-MS?
- Met behulp van deze techniek ontstaan er andere fragmenten dan wanneer er GC-MS als techniek gekozen zou worden.
- Er bestaan dan ook andere bibliotheken voor de twee verschillende technieken, maar hier heeft lang het probleem gezeten voor de LC-MS/MS.
- Ook bij deze techniek is derivatiseren soms nodig, maar dit is alleen als de stoffen geen UV absorberen, maar er wel gebruik gemaakt wordt van een UV-detector.
Je hebt MALDI-MS (I), TOF-SIMS, DESI-MS (I). Dit zijn andere MS-analyses die worden gebruikt voor imaging. Leg van MALDI-MS uit wat hiermee kan worden gedaan en benoem een nadeel
Je hebt MALDI-MS (I), TOF-SIMS, DESI-MS (I). Dit zijn andere MS-analyses die worden gebruikt voor imaging. Leg van DESI-MS uit en wat is hierbij belangrijk?
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden
![Trustpilot-logo](/images/design_2020/lp/clp-trustpilot-nl.png)