Startpagina / Samenvattingen / Class notes - Hematologie / geteld-leukocyten-cellen

Principes van celtelling

Q: Door middel van welke methodes kunnen bloedcellen worden geteld?

- Microscopische telling met fasecontrast microscoop en telkamer (vroeger): klein glazen instrument met gegraveerde lijnen waarop verdund bloed met een kleurstof wordt aangebracht. Binnen een bekend volume kan het aantal cellen worden geteld, waarna rekening houdend met de gebruikte verdunning de celconcentratie kan worden berekend. Nadelen: tijdrovend, grote onnauwkeurigheid, weinig hygiënisch. - Elektronische telling met geautomatiseerde celtelapparatuur (momenteel): Impedantie methode : op basis van spanningsverschil Optische methode : op basis van lichtverstrooiing

5 belangrijke vragen over Principes van celtelling

Door middel van welke methodes kunnen bloedcellen worden geteld?

- Microscopische telling met fasecontrast microscoop en telkamer (vroeger): klein glazen instrument met gegraveerde lijnen waarop verdund bloed met een kleurstof wordt aangebracht. Binnen een bekend volume kan het aantal cellen worden geteld, waarna rekening houdend met de gebruikte verdunning de celconcentratie kan worden berekend.
Nadelen: tijdrovend, grote onnauwkeurigheid, weinig hygiënisch.

- Elektronische telling met geautomatiseerde celtelapparatuur (momenteel):
Impedantie methode: op basis van spanningsverschil
Optische methode: op basis van lichtverstrooiing

Waarom zal bij een elektronische telling de aanwezigheid van trombocytenaggregaten kunnen leiden tot een hoge leukocytenconcentratie (pseudoleukocytose), terwijl de fout in de erytrocytenconcentratie veel beperkter is?

Trombocyten-aggreagaten lijken qua grootte op leukocyten en erytrocyten (zijn ongeveer even groot):
- Bij de erytrocytentelling wordt de erytrocytenconcentratie niet erg beïnvloedt, omdat erytrocyten in veel grotere aantallen voorkomen dan trombocyten. De trombocyten-aggregaten die dan geteld worden als erytrocyten verhogen daardoor de erytrocytenconcentratie verwaarloosbaar weinig.
- Bij de leukocytentelling worden de trombocyten-aggregaten als leukocyten geteld en doordat leukocyten en trombocyten in ongeveer dezelfde hoeveelheid voorkomen in het bloed (veel minder dan erytrocyten) leidt dit tot een hogere leukocytenconcentratie dan normaal (pseudoleukocytose).

Wat zijn de statische aspecten van de verschillen methodes voor celtelling?

Klein aantal getelde cellen:
- Kans op coïncidentie is klein
- Hoge variatie coëfficiënt (foutenmarge)

Groot aantal getelde cellen:
- Kans op coïncidentie neemt toe naar mate er meer cellen worden geteld.
- Lage variatie coëfficiënt (foutenmarge)

Voor de telling van leukocyten in een telkamer wordt bloed 10 maal verdund met een telvloeistof. Deze verdunde suspensie wordt in een telkamer gebracht met een inhoud van 0,1 mm^3. In dit volume worden 63 leukocyten geteld. Bereken de standaarddeviatie (SD) en variatiecoëfficiënt (CV) van de leukocytenconcentratie in bloed (deze wordt uitgedrukt in 10^9/L).

63 leukocyten geteld in 0,1 mm^3 (= 0,1*10^-6 L)

10x verdund: 63 * 10 = 630 leukocyten in 0,1*10^-6 L
Leukocytenconcentratie = 630 leukocyten / (0,1*10^-6 L) = 6,3*10^9 / L
Standaarddeviatie (SD) = √aantal getelde cellen = √63 = 7,94
Variatiecoëfficiënt (CV) = (SD / gemiddelde van de telling) * 100% = (7,94 / 63) * 100% = 12,6% = 13% foutenmarge

Voor een elektronische telling van leukocyten wordt bloed 1:249 verdund met elektroytenoplossing en in 100 µl van deze verdunning worden 2520 cellen geteld. Bereken de leukocytenconcentratie in bloed en de standaarddeviatie (in 10^9/L).

2520 cellen geteld in 100 µL (= 100*10^-6 L)

250x verdund: 2520 * (250) = 630.000 leukocyten in 100*10^-6 L
Leukocytenconcentratie = 630.000 leukocyten / (100*10^-6) L = 6,3*10^9 / L
SD = √2520 = 50,2
CV = (50,2 / 2520) * 100% = 2% foutenmarge
Elektronische telling is nauwkeuriger, want er kan meer geteld worden wat leidt tot een kleinere foutenmarge.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

Hematologie

Bekijk samenvatting