Startpagina / Samenvattingen / Class notes - Kwantitatieve Moleculaire Biologie / fluorescentie-deeltje-groter

Meten aan moleculen en cellen middels fluorescentie

9 belangrijke vragen over Meten aan moleculen en cellen middels fluorescentie

Hoe vindt fluorescentie plaats?

Eerst neemt een deeltje straling op, waardoor het zich in de aangeslagen toestand bevindt. Hierna vindt relaxatie plaats, wat resulteert in de uitzending van straling. Het uitgezonden deeltje heeft een grotere golflengte dan het geabsorbeerde deeltje.

Voor welke golflengte kies je als je je stof wil aanslaan?

Voor een golflengte rond het maximum van je absorptiespectrum

Hoe kan fluorescentie gebruikt worden bij analyse?

Hierbij zijn fluorochromen toepasselijk. Zij hebben een karakteristiek absorpie(lager)- en emissie(hoger)spectrum. Te analyseren groepen kunnen fluorescentie worden gegeven, en wel op twee manieren:

Intrinsieke fluorescentie: Tyr, Trp(, Phe) hebben specifieke absorptiecurves en kunnen zo herkend worden
Extrinsieke fluorescentie: fluorescente groepen worden gekoppeld aan aminozuren (of DNA). Dit kan door primaire amines (N-terminus + lysines), of thiol groups (Cys-SH)

Welke aminozuren in je eiwit zijn intrinsiek fluorescent?

Tyrosine, Tryptofaan, fenylalanine

Noem fluorescentietoepassingen in vitro (in een reageerbuis)

Concentratiebepaling: fluorescentiespectrometrie

Complexvorming*: microscale thermophoresis, fluorescentie anisotropie, Förster Resonance Energy Transfer (FRES, zegt ook iets over de conformatie)

* Proces waarbij meerdere, mogelijk geladen, moleculen samen een nieuwe grotere verbinding vormen: een complex.

Wat is intrensieke fluorescentie en extrinsieke fluorescentie?

Intrinsiek is het vermogen van een stof om zelf te fluoresceren. Extrensiek is het koppelen van een specifieke fluorescerende stof aan een specifiek aminozuur

Wat is microscale thermophoresis?

Het fluorescent labelen aan een stof, om de stof zichtbaar te maken

Hoe werkt microscale thermophoresis precies?

Een monster wordt lokaal opgewarmd
Hierdoor diffunderen moleculen weg uit de laserbundel
De fluorescentie wordt in de 'steady state' gemeten

In een grafiek zet je Fnorm uit tegen de concentratie. Bij een bepaald punt F is de helft van de concentratie omgezet tot een bepaald complex. Dit is Kd (dissociatieconstante)
Hierbij kan een typische en een atypische respons plaatsvinden

=> complexvormingbepaling

Wat is förster resonance energy transfer? (FRET)?

Twee fluorescente labels koppelen die dicht bij elkaar zitten, waardoor energieoverdracht kan plaatsvinden, waardoor de afstand tussen de labels bepaald kan worden.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

Kwantitatieve Moleculaire Biologie

Bekijk samenvatting

Een unieke studie- en oefentool
Nooit meer iets twee keer studeren
Haal de cijfers waar je op hoopt
100% zeker alles onthouden

Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.

Studiemateriaal generieke omslagafbeelding

Meten aan moleculen en cellen middels fluorescentie

9 belangrijke vragen over Meten aan moleculen en cellen middels fluorescentie

Hoe vindt fluorescentie plaats?

Voor welke golflengte kies je als je je stof wil aanslaan?

Hoe kan fluorescentie gebruikt worden bij analyse?

Welke aminozuren in je eiwit zijn intrinsiek fluorescent?

Noem fluorescentietoepassingen in vitro (in een reageerbuis)

Wat is intrensieke fluorescentie en extrinsieke fluorescentie?

Wat is microscale thermophoresis?

Hoe werkt microscale thermophoresis precies?

Wat is förster resonance energy transfer? (FRET)?

Samenvattingen die gerelateerd zijn aan Lading en Elektriciteit in de Biologie

Class notes - Kwantitatieve Moleculaire Biol…

Exploring humans an introduction to the phil…

Psychologie & sociologie : basiscursus

sheets

Leren veranderen

Overheidsfinanciën

Hoofdzaken socialezekerheidsrecht

Handboek van het Nederlandse staatsrecht

Van de BV en de NV

Socialezekerheidsrecht

Schets van het Nederlandse arbeidsrecht

Internationaal publiekrecht in vogelvlucht