Samenvatting: Mbt

Studiemateriaal generieke omslagafbeelding
  • Deze + 400k samenvattingen
  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Gebruik deze samenvatting
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo

Lees hier de samenvatting en de meest belangrijke oefenvragen van MBT

  • Basisprincipes van de PCR

    Dit is een preview. Er zijn 222 andere flashcards beschikbaar voor hoofdstuk 20/10/2017
    Laat hier meer flashcards zien

  • Waarop baseer je een PCR?

    DNA replicatie in een cel 
    - DNA polymerase beweegt over het DNA van 3 -> 5
    - DNA polymerase maakt nieuw DNA van 5-> 3
  • Wat is het verschil tussen replicatie en PCR?

    1. RNA primers/ artificiële DNA primers (oligo's)
    2. 37C en 96C
    3. helicase bij replicatie, taq polymerase (72C) bij PCR
  • Wat is het protocol van PCR?

    1. denaturatie ( = uitsmelten) 90-96C, 15-30 sec
    2. annealing (= hybridisatie primer) 50-65C, 15-30 sec
    3. extensie ( = elongatie door polymerase) 72C, 30s-5 min
    (4. DNA synthese 72C, 10 min)
  • Waar bevinden alle stoffen zich bij de fenol/chloroform isolatiemethode?

    Eiwitten in de interfase, nucleinezuren en koolhydraten in de waterfase (bovenste fase), organische oplosmiddelen en vetten onderin de buis.
    Na preciptatie met isopropanol is het DNA/RNA op de bodem neergeslagen.
  • Waaraan moet een primer design aan voldoen?

    • 3'end G of C
    • 17-28 bp
    • 40-60% GC
    • dimeren en interne 'self-annealing' voorkomen
    • Tm tussen 50-70C
  • Waarom manipuleer je DNA?

    - eiwit in grote hoeveelheden produceren
    - functie van genen of domeinen van genen te onderzoeken
    - effect van gen mutanten bestuderen
    - promotor activeren
    - eiwit fluorescent maken en lokalisatie volgen
  • waarom wordt cDNA gebruikt in PCR?

    Omdat DNA-polymerases gebruikt worden en er dus geen RNA vermenigvuldigd kan worden. Daarom wordt er cDNA van RNA gemaakt.
  • Hoe wordt cDNA gemaakt?

    m.b.v. een reverse transcriptase en één primer. Er onstaat dan een RNA-DNA hybride die tijdens de eerste denaturatiestap vd PCR gedenatureerd zal worden.
  • Wat zijn de regels bij het ontwerpen van primers?

    - Tussen 17-28 bp
    -Tussen 40 en 60% GC
    - Een GC aan het 3'
    - Een Tm tussen 55 en 70 C
    -Beide primers moeten dezelfde Tm hebben (max 2 C verschil)
  • Wat zijn de voordelen van qPCR?

    -Minder kans op contaminatie doordat je geen analyse meer hoeft uit te voeren.
    -Hoeveelheid product wordt gemeten, waardoor kwantificering van startmateriaal mogelijk is.
    -Meerdere PCR producten tegelijk meten in één reactie.

Om verder te lezen, klik hier:

Lees volledige samenvatting
Deze samenvatting +380.000 andere samenvattingen Een unieke studietool Een oefentool voor deze samenvatting Studiecoaching met filmpjes
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Onderwerpen gerelateerd aan Samenvatting: Mbt