Het knippen van DNA met restrictie-enzymen - Enzymatische reactie
5 belangrijke vragen over Het knippen van DNA met restrictie-enzymen - Enzymatische reactie
Welke stappen kunnen er onderscheiden worden in het knippen van een dubbelstrengige DNA?
- Een eerste enkelstrengige breuk wordt aangebracht (= nick);
- Een nieuw complex wordt met het ‘nicked’ DNA gevormd;
- De tweede streng van het DNA wordt geknipt.
Wat gebeurt er met het DNA indien er een lage temperatuur is bij het knippen?
Door wat wordt de snelheid van de reactie beïnvloed en wat is het gevolg?
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Geef een voorbeeld van de enzymen waarbij het verschil in reactiesnelheid zeer groot is.
Het plasmide pBR322 heeft vier NarI plaatsen waarvan er twee normaal te knippen zijn, maar waarbij de andere twee nooit volledig geknipt worden, zelfs niet met een 50x overmaat van het enzym en een reactieduur die 16 maal langer is dan normaal.
Een algemeen verschijnsel is de moeilijkheid om eindstandige restrictieplaatsen volledig te knippen, hoe wordt dit opgelost?
- Meestal is hiervoor een veel grotere hoeveelheid enzym vereist en/of een langere incubatieduur. Dit werd uitgetest op oligonucleotiden.
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden