Startpagina / Samenvattingen / Class notes - Moleculaire Biotechnologie / pcr-ngs-sanger-sequencing

Sequentie technieken

4 belangrijke vragen over Sequentie technieken

Hoe worden de nucleotide sequenties bepaald bij Sanger-sequencing?

De nucleotide volgorde wordt bepaald door de PCR-producten over een gel te laten lopen en de fluorescentie te meten. Elk type ddNTP's is gemerkt met een specifieke fluorescerende molecule, waardoor de volgorde van de nucleotiden kan worden vastgesteld.

Wat zijn de verschillen tussen Sanger-sequencing en next generation sequencing (NGS)?

NGS is geschikter voor grotere hoeveelheden DNA, vindt altijd in real-time plaats zonder gel elektroforese en maakt de DNA-sequentie zichtbaar door het lichtpatroon. In tegenstelling tot Sanger-sequencing, is bij NGS geen analyse van achteraf bandjes nodig.

Wat zijn de voordelen van beyond next generation sequencing-methoden?

De voordelen van beyond NGS-methoden omvatten het sequencen van grotere DNA-stukken tot aan genomen, eliminatie van de PCR stap, kostenbesparing, handzaamheid (geschikt voor veldwerk) en meting van elektrische stroom die informatie geeft over de nucleotiden.