DNA-isolatie - DNA kwantificatie

9 belangrijke vragen over DNA-isolatie - DNA kwantificatie

Wat kunnen redenen  zijn wanneer er vrijwel geen DNA opbrengst is na isolatie (5)?

  • Het kan zijn dat de eluatie stap niet voldoende is uitgevoerd waardoor alles nog op de kolom zit.
  • Lysis van de bacteria cellen niet is gelukt.
  • Tijdens de groei van de bacteriën is plasmide al verloren geraakt door niet voldoende antibiotica
  • bacteriële cultuur te oud.
  • Neutralisatie stal met A3 buffer is niet volledig verlopen.

Wat kunnen redenen zijn voor slechte kwaliteit van het geïsoleerde plasmide DNA?

  • Lysis stap te lang geincubeerd, waardoor DNA is gaan breken.
  • Zit genomisch DNA in de oplossing door te ruwe centrifuge na lysis.

Bij welke golflengte absorbeert DNA/RNA?

260nm
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Bij welke golflengte absorbeert eiwit?

280nm

Bij welke golflengte absorbeert ethanol en andere organische verbindingen?

230nm

Wat betekend het wanneer de A260/A280 ratio NIET tussen de 1.8 - 2.0 valt?


Wanneer deze lager uitvalt duid dit op eiwit verontreiniging en wanneer deze hoger uitvalt duid dit op RNA verontreiniging.

Wat betekend het wanneer de A260/A230 ratio NIET tussen de 2.0 en de 2.2 valt?

Wanneer deze lager of hoger uitvalt duid dit op contaminatie met stoffen zoals extractie reagentia, fenolen, zouten en andere organische verbindingen.

In welke concentratie geeft de nanodrop de opbrengst aan DNA?

In ng/uL

Waar moet je allemaal op letten bij de resultaten van de nanodrop?

  • Dat het verloop van de curve vloeiend moet zijn.
  • Duidelijke piek bij 260nm
  • Er mag geen piek zijn bij 280nm.
  • Er mag geen piek zijn bij 230nm.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo