Sequencing van DNA
3 belangrijke vragen over Sequencing van DNA
Hoe worden de verschillende lengtes aan DNA die tijdens de sequentie reactie zijn geproduceerd van elkaar gescheiden?
- Alle DNA strengen worden door een cappilair gezogen, hierin zit een gel.
- De kleinere stukken DNA migreren gemakkelijker door de gel dan de grotere stukken DNA waardoor de stukken van klein naar groot worden gesorteerd.
- Vervolgens gaat er aan het einde een laser door het cappilair waardoor de fluorescent gelabelde ddNTPS fluorescentie uitscheiden die wordt gedetecteerd. Elke ddNTP met een andere kleur. (G, C, A en T)
- Zo kan de DNA sequentie worden afgelezen.
Wat wil je met een DNA sequentie controleren?
- Controleren of het ontwerpen template DNA identiek is aan de referentie sequentie
- Onbedoelde mutaties zijn geïntroduceerd
- Gewenste mutatie er wel juiste inzit
- Of het reading frame van de gene of interest wel mooi doorloopt.
Waarom is het beter om een sequentie zowel forward als reverse te sequencen?
Het kan zijn dat bepaalde stukken lastiger zijn te sequencen waardoor er dubbele pieken ontstaan. Door ook vanuit een andere richting te sequencen kan het lukken om eventuele onduidelijke stikstofbasen een correcte base-call te geven.
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
