Ligatie
5 belangrijke vragen over Ligatie
Hoe kan je voorkomen dat insert in twee oriëntaties in de vector past?
- Dit kun je voorkomen door 1 kant met een enzym te knippen die blunt knipt en de andere kant sticky. Op die manier kan het insert er maar op 1 manier inpassen. Blunt en sticky kunnen namelijk niet aan elkaar worden geligeerd.
- Door te knippen met verschillende enzymen die alleen in de richting van het ORF geligeerd kunnen worden.
Hoe voer je een ligatie reactie uit?
- Maak een pipetteer schema net zoals bij de digestie en pipetteer alles zoals bij digestie (dus groot volume eerst en dan als laatste het enzym ligase)
- Meng alles goed en incubeer 20 minuten op kamer temperatuur
- Na ligatie kan het op ijs worden bewaard of gelijk getransformeerd worden in de juiste bacterie stammen.
Wat is de verhouding vector en insert?
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Waarom wordt er 500ng pET gebruikt voor de ligatie en geen 50ng?
Wat is belangrijk om een stuk DNA tot uiting te laten brengen?
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden