Onderdeel 3: Westernblot + immunokleuring - Trouble shooting Westernblot/immunokleuring
4 belangrijke vragen over Onderdeel 3: Westernblot + immunokleuring - Trouble shooting Westernblot/immunokleuring
Wat kan je voor een western-blot doen om het achtergrond signaal te verlagen?
- Blocking buffer aanpassen, bijvoorbeeld melk vervangen voor BSA of andersom.
- Grotere verdunningen van het primaire/secundaire antilichaam gebruiken.
- Meer of langere wasstappen gebruiken tussen de verschillende incubatie stappen.
- Hogere zoutconcentraties gebruiken in de wasbuffers.
- Kortere keuringstijd gebruiken.
Hoe kun je as-specifieke bindingen van antilichamen reduceren?
- Lagere concentraties van antilichamen gebruiken.
- Kortere incubaties met antilichamen
- Hogere temperaturen tijdens de wasstappen
- hogere zoutconcentraties wasbuffer
- Andere antilichamen testen.
Wat kun je doen wanneer je geen of zwak signaal hebt op de western blot?
- Verhogen antistof concentraties
- Verlagen van de blocking buffer
- Meer eiwit laden.
- Transfer time verhogen
- Hogere cijfers + sneller leren
- Niets twee keer studeren
- 100% zeker alles onthouden
Wat kun je doen wanneer er niet specifieke of gedifusseerde bandjes zijn gezien?
- Antistof concentratie verlagen.
- Minder eiwit op de gel laden
- kleuring tijd verminderen
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden