PCR - qPCR - Probes + kleurstoffen
3 belangrijke vragen over PCR - qPCR - Probes + kleurstoffen
Hoe kan Taqman probe licht emisseren?
- Taqman probe met de PCR primers binden aan het target DNA.
- Taq polymerase verlengt vervolgens het DNA van 5' naar 3'.
- Wanneer de polymerase de probe bereikt verwijdert hij 1 voor 1 de nucleotide van de probe en wordt de afstand tussen het fluorchroom en de quencher groter.
- Door dat de quencher nu het licht niet meer uitdooft ontstaat er een detecteerbaar fluorescentie signaal.
Hoe kan een molecular beacon fluorescentie gaan uitstralen?
- Het circulaire gedeelte van de probe (hairpin) bindt aan het target DNA
- Hierdoor klapt deze uit elkaar waardoor het fluorchroom en de quencher van elkaar liggen en ontstaat er een detecteer baar signaal.
Waarom kunnen wij de fluoriscentie met een molecular beacon alleen waarnemen tijdens de annaealingfase?
Dit komt doordat polymerase de probe weer van het template DNA afduwt waarna de hairpin weer terugschiet en dus het signaal niet meer detecteerbaar is.
De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:
- Een unieke studie- en oefentool
- Nooit meer iets twee keer studeren
- Haal de cijfers waar je op hoopt
- 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
