Startpagina / Samenvattingen / Class notes - Moleculaire celbiologie Theorie (MCB) / eiwit-zijde-n-terminus

Recombinant DNA, in-frame kloneren en gibson klonering

7 belangrijke vragen over Recombinant DNA, in-frame kloneren en gibson klonering

Welke twee problemen kunnen zich voordoen als je een eukaryotisch eiwit tot expressie wilt laten brengen in een prokaryoot?

Prokaryoten kunnen niet aan post-translationele modificatie doen en kunnen ook geen splicing uitvoeren. Dit heeft tot gevolg dat eukaryotische eiwitten vaak niet functioneel kunnen worden gemaakt in een prokaryoot.

Wat is het verschil tussen de N-terminus en de C-terminus?

De N-terminus is het begin van een eiwit en de C-terminus is het einde van een eiwit.

Waar kun je een tag hangen aan een fusie eiwit?

Dit kun je aan de N-terminale zijde doen, aan de C terminale zijde of aan een kant of aan beide kanten.

Wat zegt de N1 in de naam van de vector pEGFP-N1?

Dit wil zeggen dat de MCS (multiple cloning site) aan de n-terminus zijde van het GFP gen ligt in het plasmide. Je kunt ook een T1 hebben dan ligt de MCS aan de einde liggen.

Wat zijn de nummers van de verschillende knipplekken van een RE

N1 RE knipt precies tussen de twee codons = plek 0
N2 RE knipt tussen het tweede en derde nucleotide = plek 2
N3 RE knipt tussen de 1ste en de tweede nucleotide = plek 1

Waar moet je ook altijd goed op letten bij het uitkiezen van de juiste RE voor het in frame klonering?

Dat het stopcodon niet weer terug geligeerd wordt. Wanneer je een RE kiest dat te dicht bij het stopcodon ligt zal tijdens de ligatie van een overhang dezelfde aminozuur sequentie weer terugkomen en zal het stopcodon er dus nog steeds in zitten. Dit zorgt er dan voor dat je gen van interesse alsnog niet kan worden getransleert.

Wat is de Gibson assambly?

Dit is een techniek waarbij meerdere stukken DNA aan elkaar kunnen worden geligeerd in 1 reactie. Doordat er in elk stuk DNA homologe sequenties voorkomen die dan aan elkaar kunnen ligeren.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

Moleculaire celbiologie Theorie (MCB)

Bekijk samenvatting

Een unieke studie- en oefentool
Nooit meer iets twee keer studeren
Haal de cijfers waar je op hoopt
100% zeker alles onthouden

Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.

Studiemateriaal generieke omslagafbeelding

Recombinant DNA, in-frame kloneren en gibson klonering

7 belangrijke vragen over Recombinant DNA, in-frame kloneren en gibson klonering

Welke twee problemen kunnen zich voordoen als je een eukaryotisch eiwit tot expressie wilt laten brengen in een prokaryoot?

Wat is het verschil tussen de N-terminus en de C-terminus?

Waar kun je een tag hangen aan een fusie eiwit?

Wat zegt de N1 in de naam van de vector pEGFP-N1?

Wat zijn de nummers van de verschillende knipplekken van een RE

Waar moet je ook altijd goed op letten bij het uitkiezen van de juiste RE voor het in frame klonering?

Wat is de Gibson assambly?

Samenvattingen die gerelateerd zijn aan Recombinant DNA, in-frame kloneren en gibson klonering

Class notes - Moleculaire celbiologie Theori…

Anatomie & fysiologie

Basisprincipes van de PCR

statistiek om mee te werken

ISE Nester's Microbiology: a Human Perspecti…

Mcmurry: Chemistry

Campbell Biology (Nederlands)

Moleculaire biologie practicum

Reed: Practical Skills in Biomolecular scien…

Aantekeningen Statistiek

Biologie 21P lesstof

Keuzevak: bloed functies en ziekten