Gen regulatie en DNA toepassingen

11 belangrijke vragen over Gen regulatie en DNA toepassingen

Hoe kun je puntmutanten maken m.b.v. PCR?

Denatureerd DNA door verbreking waterstofbruggen. Primer veranderen dan introduceren in vector. Meerdere cicels met puntmutatie.

Wat kun je onderzoeken met micro-arrays?

Hier mee kun je onderzoeken welke genen tot expressie komen in cel.

https://www.youtube.com/watch?v=NgRfc6atXQ8&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=7

Hoe kun je de expressie van een vreemd gen in E. coli reguleren?

Door middel van de lac operon methode.
  • Hogere cijfers + sneller leren
  • Niets twee keer studeren
  • 100% zeker alles onthouden
Ontdek Study Smart

Hoe werkt het Lac operon in bacteriën?

Is een aantal te introduceren set van genen. Deze zijn verantwoordelijk voor het omzetten van lactose in suikers. Lactose bind aan de repressor en zorgt ervoor dat de repressor vrij komt van de DNA keten. RNA polymerase zet de keten om in mRNA. Ribosomen binden aan het mRNA en zetten dit om in de polypeptide keten. Permease zorgt voor doorlating lactose buiten de cel naar binnen de cel. Lactose heft zijn binding na een bepaalde tijd op met de repressor, en de respressor bindt opnieuw aan de DNA keten.

https://www.youtube.com/watch?v=iu4s3Hbc_bw&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=3

Op welke niveau's en hoe vindt expressie regulatie plaats bij eukaryoten?

  • Procaryoten geen RNA processing dus bijna geen regulatie.
  • Eukaryoten regulatie RNA mRNA of DNA niveau. Regulatie op eiwit niveau.

Er zijn ongeveer 20.000 menselijke genen die coderen voor eiwitten. De menselijke cel kan 75.000 tot 100.000 verschillende eiwitten maken. Leg uit hoe dat kan.

Alternative splicing, waarbij een mRNA keten, op meerdere manieren kannen worden geknipt in kleinere fragmenten.

Hoe werkt de RT-PCR techniek?

  1. mRNA -> complementaire DNA keten. Dit wordt gedaan doormiddel van een poly-DT primer of een aantal thymine DNA basen.
  2. Ander enzym degradeert mRNA, en DNA polymerase wordt dan gebruikt om de complementaire DNA strand te synthetiseren. Dubbel gebonden DNA strengen (cDNA)
  3. cDNA wordt gebruikt om te achterhalen welke genen er naar voren komen.
  4. PCR wordt uitgevoerd (waarbij dus het stukje gen wordt vermenigvuldigd).
  5. Uitvoeren gel elektroforese om te kijken of het stukje cDNA aanwezig is.


https://www.youtube.com/watch?v=j3ajN0DKaEw&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=2

Hoe werkt de q-PCR techniek?

  1. RNA wordt omgezet in DNA en zijn complementaire DNA keten.
  2. Het gen wat hierbij geïsoleerd is wordt vermenigvuldigd.
  3. Hierbij wordt het gen wat gedetecteerd moet worden middels fluorescentie gedetecteerd.

wordt gebruikt om de hoeveelheid monster in DNA te bepalen.

https://www.youtube.com/watch?v=iu4s3Hbc_bw&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=3

Wat gebeurd er bij site directed mutagenese?

  1. Gen moet gecloneerd worden in een single strand vector om vervolgens het gemuteerde gen in te brengen.
  2. Introductie van een gecloond mutant gen in een gast-cel. Expressie gen.
  3. Onderzoek naar gen's gewijzigde functie.


https://www.youtube.com/watch?v=cCUKopDvTks&list=PL5Tt51-5WsX3LtNQ9J7evpl1zQ-lk7-Ba&index=13

Wat houdt RNA degradatie in?

De levensduur van mRNA moleculen in het cytoplasma bepaalt mede wat de eiwitsamenstelling/verhouding is in het cytoplasma. Bacteriële mRNA moleculen worden snel afgebroken (na enkele minuten). In meercellige eukaryoten kan het mRNA uren tot zelfs weken aanwezig blijven, zodat translatie vanuit dit mRNA herhaaldelijk kan blijven plaatsvinden.

Wat doen regulatie eiwitten?

Binden aan 5 UTR/ 3 UTR voorkomen binding ribosomen -> blokkeren translatie initiatie.

De vragen op deze pagina komen uit de samenvatting van het volgende studiemateriaal:

  • Een unieke studie- en oefentool
  • Nooit meer iets twee keer studeren
  • Haal de cijfers waar je op hoopt
  • 100% zeker alles onthouden
Onthoud sneller, leer beter. Wetenschappelijk bewezen.
Trustpilot-logo